莱昂·S·肯尼迪是整个《生化危机》系列中最为知名、人气最高的角色之一，他是一名专业反恐人员，工作经验丰富。他在《生化危机2》中首次亮相，之后一直在系列的各个版本中出现。莱昂的形象非常英俊，典型的美式英雄，但是与一些其他的美式英雄形象不同的是，他有着非常精湛的枪法和斗志。
克莱尔·雷德菲尔德是《生化危机》系列中出品最多的女性角色之一，也是唯一一个拥有自己的独立故事线的女性角色。她是一名细心、有责任心、懂得自卫的女性，有超过十年的反恐训练体验。她第一次亮相是在《生化危机2》中，之后也在一系列的续作版本中出现过。她的形象非常美丽，但是她也是一个实用型人物，在游戏中扮演的角色非常重要。
吉尔·瓦伦蒂因是《生化危机》系列中的另一个受欢迎的角色，她是一个聪明、果断、有领导才能的年轻女子。她第一次亮相是在《生化危机》的原始版本中，是一个刚刚步入反恐行业的年轻人，随着游戏的续作版本不断出现，她的角色也不断地发展和壮大，从一个年轻的反恐人员，逐渐成为了一个有着丰富经验的专业人员。
乔克·纳瓦罗是一个相对来说比较新的《生化危机》系列角色。他主要亮相在《生化危机6》的故事线中，是一个非常重要的支持角色之一。他是一个非常多才多艺的人，精通各种武器，尤其以火器的精通而著名。他的外形看起来比较机械化，他的性格也非常冷静、淡定，是一个比较典型的军人形象。
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